Stammzellen-WSR können unterschieden – uni-hilft – Stammzellspender – Lokalgruppen
werden Obwohl die Ableitung uni-hilft von WSR
ohne Trennung vom TE möglich ist, weist eine solche Kombination wachstumsgrenzen auf. Da proliferierende Aktionen begrenzt sind, wird in der Regel eine ko-Kultur dieser Aktionen vermieden. ESCs werden von der inneren Zellmasse der Blastozyste abgeleitet, die ein Stadium des präimplantationsembryos ca ist. 4 Tage nach der Befruchtung. Danach werden diese Zellen in eine mit Kulturmedium gefüllte Kulturschale gegeben. Passage ist ein ineffizienter, aber beliebter Prozess der subkultivierung von Zellen zu anderen Gerichten. Diese Zellen können als pluripotent beschrieben werden, da Sie sich schließlich in jeden Zelltyp im Organismus differenzieren können. Seit Beginn Ihres Studiums gab es ethische Einschränkungen im Zusammenhang mit der medizinischen Anwendung von ESCs in Therapien. Die meisten embryonalen Stammzellen werden aus Eiern entwickelt, die in einer in-vitro-Klinik befruchtet wurden, nicht aus in vivo befruchteten Eiern. Somatische oder Adulte Stammzellen sind undifferenziert und finden sich nach der Entwicklung unter differenzierten Zellen im ganzen Körper. Die Funktion dieser Zellen besteht darin, die Heilung, das Wachstum und den Ersatz von Zellen zu ermöglichen, die jeden Tag verloren uni-hilft
gehen. Diese Zellen haben einen begrenzten Bereich von differenzierungsoptionen. Unter vielen Arten gibt es folgende: Mesenchymale Stammzellen sind in vielen Geweben. Im Knochenmark differenzieren sich diese Zellen hauptsächlich in Knochen -, Knorpel-und Fettzellen. Als Stammzellen sind Sie eine Ausnahme, weil Sie pluripotent wirken und sich auf die Zellen jeder Keimschicht spezialisieren können. Neuronale Zellen führen zu Nervenzellen und Ihren Stützzellen—oligodendrozyten und Astrozyten. uni-hilft Hämatopoetische Stammzellen bilden alle Arten von Blutzellen: rote, weiße und Blutplättchen. Hautstammzellen bilden beispielsweise Keratinozyten, die eine schützende Hautschicht bilden. Die proliferationszeit somatischer Stammzellen ist länger als die von ESCs. Es ist möglich, Adulte Stammzellen wieder in Ihren pluripotenten Zustand umzuprogrammieren. Dies kann durch übertragung des adulten
- Kerns in das Zytoplasma einer Eizelle oder durch fusion mit der pluripotenten Zelle erfolgen. Die gleiche Technik wurde beim Klonen der berühmten Dolly-Schafe verwendet. hESCs sind an der ganzkörperentwicklung beteiligt. Sie können sich in pluripotente, totipotente, multipotente und unipotente Zellen differenzieren (Abb. 2) [2]. Abb. 2 Abbildung 2 Veränderungen in der Potenz von Stammzellen in der menschlichen Körperentwicklung. Die
- Potenz reicht von pluripotenten Zellen der Blastozyste bis hin zu unipotenten Zellen eines bestimmten Gewebes in einem menschlichen Körper wie Haut, ZNS oder Knochenmark. Eine umgekehrte uni-hilft Pluripotenz kann durch die Bildung induzierter pluripotenter Stammzellen unter Verwendung des
- octamer-bindenden transkriptionsfaktors (Oct4), des geschlechtsbestimmenden Bereichs Y (Sox2), des Kruppelähnlichen Faktors 4 (Klf4) oder des Myc-Gens erreicht werden Bild in voller Größe uni-hilft Pluripotente Zellen können als totipotent bezeichnet werden, wenn Sie zusätzlich uni-hilft extraembryonale Gewebe des Embryos bilden können.
Multipotente Zellen Stammzellspender sind bei der Differenzierung
auf jeden Zelltyp des gegebenen Gewebes beschränkt. Wenn Gewebe nur eine Zelllinie enthält, werden Stammzellen, die Sie bilden, entweder als oligo – oder unipotent bezeichnet. iPSC Qualitätskontrolle und Erkennung durch morphologische Unterschiede Die Vergleichbarkeit von stammzelllinien verschiedener Individuen ist erforderlich, damit iPSC-Linien in Therapeutika eingesetzt werden können [3]. Unter den kritischen Qualitätsverfahren kann Folgendes unterschieden werden: Kurze Tandem-wiederholungsanalyse—dies ist der Vergleich spezifischer loci auf der DNA der Proben. Es wird verwendet, um eine genaue Anzahl von sich wiederholenden Einheiten zu Messen. Eine Einheit besteht aus 2 bis 13 nukleotiden, die sich viele Male auf dem DNA-Strang wiederholen. Eine polymerase-Kettenreaktion wird verwendet, um die Länge kurzer tandemwiederholungen zu überprüfen. Das genotypisierungsverfahren von quellgewebe, Zellen sowie Stammzellspender iPSC-Samen-und stammzellbanken wird empfohlen. Identitätsanalyse – das unbeabsichtigte Umschalten von Leitungen, was zu einer Kontamination anderer stammzelllinien führt, erfordert einen strengen Test zur Identifizierung von Zelllinien.
- Restvektortests—das auftreten von reprogrammierungsvektoren, die in das Stammzellspender wirtsgenom integriert sind, ist gefährlich, und das testen Ihrer Anwesenheit ist ein obligatorisches Verfahren. Es ist ein Häufig verwendetes Verfahren zur Erzeugung hochwertiger iPSC-Leitungen. Ein akzeptabler Schwellenwert
- für hochwertige iPSC-linienkollektionen in forschungsqualität beträgt ≤ 1 plasmidkopien pro 100 Zellen. Während des Verfahrens sollten 2 verschiedene Regionen, die allen Plasmiden gemeinsam sind, als spezifische Ziele verwendet werden, Z. B. EBNA-und CAG-Sequenzen [3]. Um die testreaktionen genau darzustellen, muss eine Standardkurve in einem Stammzellspender Träger von gDNA aus einer gut charakterisierten hPSC-Linie vorbereitet
- werden. Für die Berechnung von plasmidkopien pro Zelle ist es entscheidend, interne Referenz-gDNA-Sequenzen zu integrieren, um beispielsweise die Quantifizierung der ribonuklease P (RNaseP) oder der humanen telomerase-reverse-Transkriptase (hTERT) zu ermöglichen. Karyotyp—eine langfristige Kultur von hESCs kann kulturgetriebene Stammzellspender Mutationen akkumulieren [4]. Aus diesem Grund ist es wichtig, der genomischen Integrität zusätzliche Stammzellspender Aufmerksamkeit zu schenken.
Karyotypische tests können Lokalgruppen durchgeführt
werden, indem repräsentative aliquoten wiederbelebt und 48-72 h kultiviert werden, bevor Zellen für die karyotypische Analyse geerntet werden. Wenn innerhalb der ersten 20 karyotypen Anomalien festgestellt werden, muss die Analyse an einer frischen Probe wiederholt werden. Wenn diese situation wiederholt wird, wird die Linie als abnormal ausgewertet. Wiederholte Anomalien müssen aufgezeichnet werden. Obwohl die karyologie ein entscheidendes Verfahren bei der stammzellqualitätskontrolle ist, hat das später diskutierte Single nucleotide polymorphism (SNP) – array eine etwa 50-mal höhere Auflösung. Virentests—Bei der Beurteilung der Qualität von Stammzellen müssen alle tests auf schädliche menschliche adventiva (Z. B. hepatitis C oder human immunodeficiency virus) durchgeführt werden. Lokalgruppen Dieses Verfahren muss bei nicht-xeno-freien kulturmitteln
- durchgeführt werden. Bakteriologie-Bakterien – oder pilzsterilitätstests können in Kultur – oder Brühe-basierte tests unterteilt werden. Alle Verfahren müssen vom Arzneibuch für die GERICHTSBARKEIT empfohlen werden, in der die Arbeit ausgeführt wird. Einzelnukleotid-Polymorphismus-arrays-
- dieses Verfahren ist eine Lokalgruppen ART DNA-mikroarray, das populationspolymorphismen erkennt, indem es den Nachweis subchromosomaler Veränderungen und den kopierneutralen Verlust der heterozygotät sowie einen Hinweis auf die zelluläre transformation ermöglicht. Die SNP-assay besteht aus drei Komponenten. Die erste besteht darin, fragmentierte Nukleinsäuresequenzen Lokalgruppen mit fluoreszierenden Farbstoffen zu Kennzeichnen. Die zweite ist ein
- array, das immobilisierte allelspezifische Oligonukleotid (ASO)-Sonden enthält. Die Letzte Komponente erkennt, zeichnet auf und interpretiert schließlich das signal. Durchflusszytometrie—Lokalgruppen Dies ist eine Technik, die Licht verwendet, um Zellen in einer heterogenen zu zählen und zu Profilieren Lokalgruppen